résumé

Les procédés de préparation sont largement utilisés dans de nombreux domaines, tels que le criblage sélectif de composés candidats ou pilotes à partir de composés nouvellement synthétisés, ou pour l'analyse structurelle d'impuretés dans les médicaments, de composants de substances naturelles ayant des fonctions spécifiques. Chromatographie en fluide supercritique préparative (préparation abrégéeSFC) avec des avantages tels que des temps d'analyse courts et un post - traitement simple, a été largement utilisé dans l'industrie pharmaceutique et de nombreux autres domaines. Pour les analyses où le nombre de pics chromatographiques est limité, comme la séparation des isomères chiraux, l '« addition itérative d'échantillons » peut améliorer l'efficacité de la purification de la préparation. Ce rapport décrit un example d'utilisation de la fonction « itérative Additive Sample » d'un chromatographe à fluide supercritique de type préparatif UC de nexera pour améliorer l'efficacité des opérations de préparation.

Mots clés: SFC préparative, échantillon d'addition itérative

1utiliserSFC pour réduire le temps d'analyse

En raison de la faible viscosité et du coefficient de diffusion élevé du dioxyde de carbone supercritique, même à des débits élevés,La pression de colonne chromatographique du SFC est également faible. Cela signifie que la vitesse d'analyse peut être augmentée sans sacrifier l'effet de la colonne chromatographique. Son temps d'analyse est donc beaucoup plus court que celui de la chromatographie liquide haute performance.

Prenons l'exemple de la séparation chirale de * en utilisant la préparationLa comparaison de la LC et du temps nécessaire à la préparation de la SFC est illustrée sur la figure 1, la préparation de la SFC ne prenant que 1 / 4 du temps de consommation de la LC préparée, améliorant ainsi l'efficacité de l'analyse.

image.1 comparaison entre HPLC et SFC pour * fractionnement Chiral (type préparé)

table1 conditions d'analyse

2Additions itératives

Le « complément itératif » est un standardLa technologie d'échantillonnage continu de l'échantillonneur automatique sil - 40 et du collecteur de fractions FRS - 40, qui utilise les intervalles de temps retenus par les pics chromatographiques pour alimenter en continu l'échantillon, ce qui permet d'économiser du temps d'analyse pour améliorer l'efficacité de la séparation, fonctionne comme illustré sur la figure 2. Lorsque vous effectuez le réglage « itérer l'échantillon », vous devez accorder une attention particulière aux points suivants:

• Uniquement pour l'analyse isocratique

• Pas de chevauchement mutuel entre les pics chromatographiques

image.2 principe de fonctionnement de "l'échantillon d'addition itérative"

3Méthode de paramétrage « itérer l'échantillon »

La fonction « itération d'échantillons » peut être trouvée dansConfiguration facile dans le logiciel labsolutions Workstation. En définissant des paramètres tels que "intervalle d'admission", "nombre d'admissions" et "temps d'attente pour le prochain prétraitement" (Figure 3) et en simulant les résultats pour un intervalle d'admission donné (Figure 4) à l'aide des résultats d'une seule passe (chromatogramme), il est facile de confirmer S'il y a chevauchement des pics chromatographiques. Pour alimenter en continu un échantillon, il est nécessaire de régler un temps d'attente approprié afin que l'échantillon puisse revenir à l'état load (à droite de la figure 5) Une fois qu'il est sorti de l'anneau d'échantillonnage (Figure 5).

image.3 réglage du paramètre « itération de l'échantillon » (pour la figure 4)

image.4 résultats de la simulation de « l'échantillon d'addition itérative » (labsolutions)

image.5 action de soupape d'échantillon (FRS - 40)

Pour le temps d'acquisition des données, entrez un produit supérieur à la durée d'une seule analyse et additionné de l'intervalle entre les échantillons et du nombre d'échantillons. Par exemple, pourDes intervalles de 0,8 minute entre les échantillons prélevés 9 fois de suite ont donné une valeur d'entrée d'au moins 7,2 minutes plus la durée d'une seule analyse (Figure 6).

image.6 temps d'acquisition des données (SPD - M40)

En ramenant la vanne de fractionnement à sa position initiale après chaque cycle d'alimentation, on peut alors recueillir les mêmes pics dans la même bouteille. Par conséquent,Le mode « additivité itérative » permet de collecter tous les pics d'un même composé dans un même flacon de collecte. La collecte des fractions se fera selon un programme temporel qui ne nécessite que la saisie d'un programme temporel pour une seule analyse, après quoi le poste de travail peut calculer automatiquement le temps de collecte des fractions en fonction de l'intervalle d'échantillonnage (fig.7 et 8)

image.7 temps de Réinitialisation de "l'échantillon d'addition itérative"

image.8 relation entre le temps de remise à zéro et l'intervalle de préparation

4« additional Sample » pour la séparation chirale des échantillons

Voici une utilisation pratiqueCas d'un médicament Chiral isolé par « prélèvement itératif», l'échantillon étant10 mg / ml * solution (méthanol). Les conditions d'analyse sont présentées dans le tableau 2 et le chromatogramme obtenu est présenté sur la figure 9. Les résultats montrent que le nombre d'admissions peut être augmenté de 3 pour les admissions conventionnelles à 9 pour les « admissions itératives » en un temps d'analyse de 10,5 minutes, améliorant l'efficacité de l'opération de préparation.

table2 conditions d'analyse

image.9 * exemples de séparation