Neb m0202s T4 ADN ligase 20000u

Caractéristiques

■ connexion efficace des extrémités visqueuses et des extrémités Plates
■ clone T / A
■ réparation de la gravure dsdna
■ construction d'une bibliothèque de clones à haute abondance
■ liaison de l'ARN et de l'ADN

Neb m0202s T4 ADN ligase 20000u

Aperçu

Cette Enzyme catalyse la formation d'une liaison phosphodiester par les extrémités 5 '- phosphate et 3' - Hydroxy adjacentes sur l'ADN ou l'ARN double brin. L'enzyme est capable non seulement de catalyser les connexions entre les extrémités affleurantes ou visqueuses, mais aussi de réparer la coupure simple brin dans l'ADN double brin, l'ARN ou le double brin hybride ADN / ARN.

source

Purifié depuisE. coliC600 pcl857 pPLc28 lig8.

Conditions de réaction

1x tampon de réaction T4 ADN ligase
[50 mm tris - HCl (pH 7,5 à 25 °C), 10 mm MgCl2, 10 mm DTT, 1 mm ATP]. * concentration terminale de l'ADN 5 'de 0,1 à 1,0 µm incubée à 16°C.
Inactivation thermique: 65°c pendant 10 minutes.

Définition de l'unité (unité d'activité visqueuse terminale)

1 unité désigne la quantité d'enzyme nécessaire pour permettre la ligature de 50% du fragment d'ADN λ digéré par hindⅢ [concentration en extrémité 5 'de 0,12 µm (300 µg / ML)] dans 20 µl de tampon de réaction ADN ligase 1x T4 à 16°C pendant 30 minutes.

concentration

400 000 unités / ML et 2 000 000 unités / ML.

Précautions

AvecE. coliContrairement à l'ADN ligase qui nécessite NAD + comme Cofacteur, le Cofacteur de l'ADN ligase T4 est l'ATP.

La T4 DNA ligase diluée doit être conservée à - 20 °C dans un tampon de stockage de glycérol à 50% (tampon de dilution a, Neb No b8001). S'il est utilisé immédiatement après la dilution, il peut également être dilué dans le tampon de réaction de l'ADN ligase T4 1x.

Tant que l'ATP 1 mm est ajouté au système réactionnel, la réaction de ligation peut être réalisée dans les quatre tampons d'endonucléase de restriction fournis par le Neb ou dans

Elle est réalisée en tampon de réaction ADN T4 - polynucléotide kinase.

T4 ADN ligase

Numéro de cargaison

Spécifications

Prix

Pékin en stock

Shanghai en stock

#M0202L

100 000 unités

avoir

avoir

#M0202M

(haute concentration 5X) 100 000 unités

avoir

avoir

#M0202S

20 000 unités

avoir

avoir

#M0202T

(haute concentration 5X) 20 000 unités

avoir

avoir

#M0202V

10 000 unités

avoir

avoir