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La méthode d'identification des poils d'animaux par détection de Polypeptides spécifiques d'espèces animales a été publiée au Japon en tant que norme (ISO) en septembre 2018 à l'aide de MALDI - TOF. En outre, il sera identifié comme la norme industrielle japonaise (JIS). Cette méthode différentielle peut être utilisée pour l'analyse, même avec seulement 1 cheveu. Ainsi, non seulement la contrefaçon du Cachemire peut être évitée, mais elle peut également être utilisée pour effectuer la discrimination des différents poils tels que les plumes, les cheveux humains et autres, ainsi que l'inspection des corps étrangers mélangés dans les aliments. La méthode a été développée par l'Institut de bio - ingénierie génomique de l'Université de technologie de Kanazawa sur la base du système Shimadzu MALDI - TOF.
Les techniques d'analyse différentielle des poils d'animaux jouent un rôle important dans tous les domaines. Les poils d'animaux sont utilisés pour fabriquer toutes sortes de produits fibreux tels que des manteaux, des hauts, des pulls, etc. Lors de la fabrication de tels produits en fibres, il est obligatoire d'identifier le type de fibres, le taux de mélange lorsque plusieurs fibres sont utilisées, conformément à la loi sur l'identification de la qualité des articles ménagers. En outre, lorsque les cheveux sont mélangés dans les aliments, l'identification de l'espèce de cheveux est essentielle pour clarifier la voie de mélange.
L'eau est éliminée et environ 90% des cheveux sont composés de protéines. La figure 1 montre la structure des poils d'animaux.

Figure 1 schéma des poils d'animaux
Les cheveux, tout en protégeant contre les chocs externes, jouent également un rôle d'isolation thermique, une fonction étroitement liée à la construction des cheveux. La protéine du cheveu contient une grande quantité de stéroïdes, par l'intermédiaire desquels de multiples structures réticulées sont formées entre les molécules. L'analyse chimique des cheveux nécessite une dissolution, en utilisant des substances appelées réducteurs pour couper les liaisons disulfures. De plus, l'extrait protéique obtenu contient de nombreuses substances telles que des protéines et des sels et doit donc être purifié par électrophorèse sur gel de Polyacrylamide (SDS - page), etc. Le processus d'identification MALDI - TOF pour les fibres de cheveux animaux est illustré à la figure 2:

Figure 2 méthode d'analyse des poils de bête par MALDI - TOF MS
Analyse du polypeptide traité MALDI - TOF MS avec détection d'échantillons cristallins sur des plaques cibles métalliques MALDI - TOF Ms. L'ajustement des conditions de détection de la puissance laser, etc., garantit une bonne résolution dans le domaine de M / z2450 - 2750 pour l'observation des pics de spécificité des espèces animales.
La détection MALDI - TOF MS est réalisée par prélèvement après * lyse des bandes protéiques SDS - page. Trouvez des pics de représentation spécifiques pour différentes espèces animales.

a)Bande 1 de la kératine II (b) Bande 2 de la kératine III

Figure 3 carte de détection MALDI - TOF MS
L'intervalle de crête différentiel M / z 2450 - 2750 et le pic spécifique entre le trio Cachemire, laine, yak ont été trouvés par la technique MALDI - TOF Ms. Comme le montre la figure 4.

Figure 4 pic de spécificité des espèces animales dans MALDI - TOF MS

Tableau 1 séquences en acides aminés des peptides spécifiques des espèces animales * 1
* 1 le pic noirci est le pic principal
Une analyse MS / MS des pics de spécificité de ces espèces animales a été réalisée et les résultats de l'arrangement des acides aminés présumés sont présentés dans le tableau 1 2). Peptide composé de 23 acides aminés, 1 entre le Cachemire et la laine et 4 acides aminés différents entre le Cachemire et la laine de yak.
Beaucoup de produits en fibre seront blanchis, décolorés, teints et autres traitements chimiques dans le processus de traitement, mais la position de pointe spéciale des cheveux d'animaux ne changera pas en raison de ces traitements, il est donc clair qu'il peut être utilisé pour identifier les types de cheveux d'animaux dans les produits en fibre.
Analyse de 1 cheveu
Lors de l'analyse des poils d'animaux dans les produits fibreux, afin d'éviter les écarts dans la composition du produit, il est bon d'effectuer un large échantillonnage du produit et de le moyenner, puis d'utiliser une partie de celui - ci. Par conséquent, une microanalyse est rarement nécessaire. D'autre part, lors de l'analyse des cheveux mélangés dans les aliments, il est recommandé d'utiliser autant d'échantillons que possible pour l'analyse.
Dans les études scientifiques, l'analyse de l'ADN des cheveux peut fournir beaucoup d'informations sur les groupes sanguins, etc., qui peuvent déterminer les caractéristiques d'un individu. Mais les poils d'animaux utilisés dans les produits fibreux n'ont pour la plupart que des Parties sèches de poils, en particulier les produits fortement teints, et sont difficiles à analyser pour l'ADN. L'analyse des protéines par la méthode MALDI - TOF MS permet de détecter adéquatement même 1 cheveu.
Les pics de spécificité varient également en fonction de l'espèce animale, mais les pics sont plus fréquents au même endroit chez les animaux ayant le même attribut. Le Cachemire et la chèvre Angora, entre autres, doivent être identifiés au microscope. Le tableau 2 représente la position de crête (M / z) des principaux pics de spécificité animale ainsi que la disposition présumée des acides aminés à partir de la base de données. La position du Sommet principal pour les chats, les renards et les chiens est la même, mais le deuxième sommet où l'on peut voir les renards est 2638 et les chiens 2641, ce qui permet de les juger. En plus des animaux présentés ici, les animaux capables d'utiliser les bases de données génomiques peuvent également spéculer et confirmer l'emplacement des pics de spécificité. De cette façon, le simple fait de regarder le spectre de M / z2450 - 2750 permet de déterminer l'espèce de poils d'animaux contenus, ce qui est une grande caractéristique de la méthode MALDI - TOF Ms.


Figure 6 1 pic spécifique à l'espèce animale résultant de l'analyse MALDI - TOF MS de cheveux

Tableau 2 arrangement des acides aminés et position de crête (M / z) des peptides spécifiques des différents poils animaux
* 1 selon la base de données NCBI ( https://www.ncbi.nlm.nih.gov/ ) Présomption
Références:
Shimadzu application News no. 65 et littérature
1) daiqixin I, Yuxian du village, yukao sasano, SEN’I GAKKAISHI、68(10)、276 (2012).
2) daiqixinichi, Yuxiang du village, yukao sasano, yanichiro Yoshioka, SEN’I GAKKAISHI,70 (6)、114 (2014).
3)ISO20418-2 Textiles - Analyse protéomique qualitative et quantitative de certaines fibres de poils animaux - Partie 2: Détection des peptides à l'aide de MALDI-TOF MS.